實驗設(shè)計原則
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迷宮結(jié)構(gòu)標(biāo)準(zhǔn)
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迷宮由兩條開放臂（30 cm × 5 cm）和兩條封閉臂（30 cm × 5 cm × 15 cm）組成，十字交叉中心區(qū)為5 cm × 5 cm。
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開放臂邊緣設(shè)置0.5 cm高凸起以防止小鼠跌落，封閉臂頂部透明亞克力板覆蓋。
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迷宮整體離地高度50 cm，臂間夾角90°，材質(zhì)為黑色磨砂PVC以消除反光干擾。
2. 環(huán)境控制參數(shù)
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光照強度：開放臂區(qū)域維持30±5 lux，封閉臂<10 lux（通過可調(diào)光LED燈控制）。
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噪音水平：實驗環(huán)境背景噪音≤45 dB，采用隔音艙或吸音材料處理。
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溫濕度：22±2℃，相對濕度40%-60%，使用獨立空調(diào)系統(tǒng)維持穩(wěn)定。
實驗操作流程
1. 動物適應(yīng)階段
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選用8-12周齡SPF級C57BL/6J雄鼠（體重20-25 g），實驗前7天單籠飼養(yǎng)。
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實驗前3天每日進行30 min環(huán)境適應(yīng)（僅開放迷宮中心區(qū)），適應(yīng)期光照強度15 lux。
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實驗前24 h禁食不禁水，實驗前1 h轉(zhuǎn)移至行為學(xué)實驗室（保持黑暗環(huán)境）。
2. 正式實驗步驟
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定位階段：將小鼠面朝封閉臂置于中心區(qū)，記錄5 min內(nèi)行為軌跡。
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數(shù)據(jù)采集：
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開放臂進入次數(shù)（四足全部進入臂區(qū)）
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頭部探出次數(shù)（軀干未進入開放臂但前肢伸出≥2 cm）
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排便粒數(shù)（作為焦慮指數(shù)輔助指標(biāo)）
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倫理要求：單只小鼠實驗間隔≥10 min，使用75%乙醇擦拭迷宮去除氣味干擾。
數(shù)據(jù)分析規(guī)范
大鼠/小鼠高架十字迷宮實驗，XR-XG201，上海欣軟
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核心指標(biāo)閾值
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焦慮樣行為判定：開放臂進入次數(shù)<3次/5 min或停留時間<15%
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運動活性指標(biāo)：總活動距離>10 m提示藥wu/基因干預(yù)可能影響運動功能
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探索行為閾值：頭部探出次數(shù)>8次/5 min提示環(huán)境新奇性偏好
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統(tǒng)計學(xué)處理
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采用雙因素重復(fù)測量方差分析（Group × Time），顯著性水平設(shè)為p<0.05。
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效應(yīng)量計算：Cohen's d>0.8視為具有臨床意義差異。
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異常值剔除：采用Grubbs檢驗（α=0.05）處理離群數(shù)據(jù)點。
質(zhì)量控制要點
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時間窗控制：每日實驗時段固定（9:00-12:00或14:00-17:00），避免小鼠生物鐘波動。
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操作一致性：實驗者與小鼠距離保持>1 m，避免視覺/聽覺接觸。
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設(shè)備校準(zhǔn)：每周使用激光測距儀驗證迷宮尺寸誤差<0.2 mm，光照度計校準(zhǔn)誤差<±2 lux。
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數(shù)據(jù)盲法：采用視頻追蹤系統(tǒng)（如Supermaze、Visutrack等動物行為學(xué)分析軟件）自動分析，人工復(fù)核比例≤20%。
特殊情形處理
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凍結(jié)行為：連續(xù)30 s無移動需終止實驗并記錄為"行為僵直"。
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墜落事件：發(fā)生跌落立即中止實驗，該數(shù)據(jù)納入"意外終止組"單獨分析。
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設(shè)備故障：實驗中斷超過2 min需重新適應(yīng)環(huán)境30 min后重測。
行為學(xué)實驗方法根據(jù)實驗人員需求調(diào)整設(shè)計，上述方案僅做參考。
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