實驗目的

曠場實驗（Open Field Test, OFT）是評估嚙齒類動物自主活動、探索行為及焦慮樣行為的經典范式。通過量化動物在開放空間中的運動軌跡、區域偏好及刻板行為，可反映中shu神經系統功能狀態及藥wu/基因干預效應。

實驗設備與環境

• 材質：白色亞克力/PVC板材（規格：50cm×50cm×40cm，底部分為25個等距方格）。
• 區域劃分：中央區（20cm×20cm）與外周區，邊緣設1cm高黑色邊界線。
• 光照：頂部LED燈提供均勻漫射光（30-50 lux，避免陰影干擾）。
• 記錄系統：頂部攝像頭（幀率≥30fps）連接行為學分析軟件（如supermaze、visutrack）。

• 溫度：22±2℃，濕度40-60%，噪聲≤60dB。
• 實驗時間：選擇小鼠活躍期（09:00-12:00），每只動物測試間隔≥10分鐘以清chu氣味。

實驗流程

1. 動物適應
• 實驗前3天每日撫摸小鼠1-2分鐘，減少人為應激。
• 實驗當日將動物提前30分鐘轉移至測試房間，適應環境。
2. 操作步驟
• 步驟1：輕握小鼠尾部，將其頭朝外壁置于曠場中央，同步啟動錄像。
• 步驟2：連續記錄5分鐘行為，實驗者遠離裝置（距離≥2m）。
• 步驟3：實驗后用75%乙醇擦拭曠場，避免氣味殘留。

核心行為學指標

數據分析方法

1. 軌跡分析：軟件自動劃分中央/外周區，計算各區域停留時間占比（中央區占比<15%提示高焦慮）。
2. 統計方法：組間比較采用獨立樣本t檢驗或ANOVA，顯著性水平設為p<0.05（SPSS/GraphPad）。
3. 異常值處理：剔除不動（總移動<200cm）或過度活躍（>1500cm）個體。

注意事項

1. 動物狀態：選用8-12周齡健康雄鼠（體重20-25g），雌鼠因動情周期影響需同步化。
2. 藥wu干預：需設置溶劑對照組，注射后30分鐘開始實驗（藥wu半衰期匹配）。
3. 重復測試：同一批動物間隔≥7天復測，避免習慣化效應。
4. 倫理要求：遵循3R原則，實驗后動物可繼續用于其他非侵入性測試。

質量控制標準

• 批次內CV（變異系數）<15%，組間基線差異≤10%。

• 中央區停留時間重復測量相關性>0.8（r≥0.8，p<0.01）。

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